Bacterias y Arqueas de la transición Andino-Amazónica del departamento del Caquetá - Proyecto Colombia BIO

Dernière version Publié par Instituto Amazónico de Investigaciones Científicas - SINCHI le Mar 20, 2019 Instituto Amazónico de Investigaciones Científicas - SINCHI

66932 registros de biodiversidad de Bacterias y Archaeas en suelos andino-amazónicos en el camino Andaki, departamento de Caquetá (Colombia) colectados en el camino Andaquí en marco de la expedición Colombia BIO, en un gradiente altitudinal con puntos de muestreo desde los 500 metros hasta los 1875.

Enregistrements de données

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Comment citer

Les chercheurs doivent citer cette ressource comme suit:

Cardona Vanegas G I, Restrepo Escobar M C, Herrera Collazos E (2018): Bacterias y Arqueas de la transición Andino-Amazónica del departamento del Caquetá - Proyecto Colombia BIO. v2.2. Instituto Amazónico de Investigaciones Científicas Sinchi. Dataset/Occurrence. https://doi.org/10.15472/6sg16z

Droits

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L’éditeur et détenteur des droits de cette ressource est Instituto Amazónico de Investigaciones Científicas - SINCHI. This work is licensed under a Creative Commons Attribution Non Commercial (CC-BY-NC) 4.0 License.

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Mots-clé

Occurrence; Bacteria; Arquea; diversidad; gen 16s rRNA; Illumina; Colombia Bio; Caquetá; Microorganismos; secuenciación de siguiente generación; Bioinformatica; Camino Andaquí

Contacts

Personne ayant créé cette ressource:

Gladys Ines Cardona Vanegas
Investigadora Asociada
Instituto Amazónico de Investigaciones científicas SINCHI Cll 20 # 5-44 Bogotá Bogotá CO
Maria Camila Restrepo Escobar
Microbióloga
Instituto Amazónico de Investigaciones científicas SINCHI Cll 20 # 5-44 Bogotá Bogotá CO
Edgar Esteban Herrera Collazos
Data Scientist
Instituto Amazónico de Investigaciones Científicas Sinchi Cll 20 # 5-44 Bogotá, D. C. Cundinamarca CO

Personne pouvant répondre aux questions sur la ressource:

Gladys Ines Cardona Vanegas
Investigadora Asociada
Instituto Amazónico de Investigaciones científicas SINCHI Bogotá Bogotá CO
Edgar Esteban Herrera Collazos
Data Scientist
Instituto Amazónico de Investigaciones científicas SINCHI Bogotá Bogotá CO

Personne ayant renseigné les métadonnées:

Edgar Esteban Herrera Collazos
Data Scientist
Instituto Amazónico de Investigaciones científicas SINCHI Cll 20 # 5-44 Bogotá Bogotá CO
Gladys Ines Cardona Vanegas
Investigadora Asociada
Instituto Amazónico de Investigaciones científicas SINCHI Cll 20 # 5-44 Bogotá Bogotá CO

Autres personnes associées à la ressource:

Processeur
Maria Camila Restrepo Escobar
Microbióloga
Instituto Amazónico de Investigaciones Científicas Sinchi Cll 20 # 5-44 Bogotá, D. C. Cundinamarca CO

Couverture géographique

La transición Andino-Amazónica, iniciando en el departamento de Huila, municipio de Acevedo y descendiendo a lo largo del camino Andaki hasta el municipio de Belén de los Andaquíes en el departamento de Caquetá. Abarca desde el bosque de niebla hasta el piedemonte amazónico.

Enveloppe géographique Sud Ouest [1.557, -75.928], Nord Est [1.719, -75.861]

Couverture taxonomique

Para el total de registros colectados se presentan 772 Arqueas y 66160 Bacterias. Los 772 registros de Arqueas corresponden a 1 Reino, 3 Filos, 9 Clases, 8 Órdenes, 11 Familias, 17 Género y 4 Especies únicas. Los 66160 registros de Bacterias corresponden a 1 Reino, 29 Filos, 69 Clases, 130 Órdenes, 254 Familias, 592 Género y 463 Especies únicas

Phylum  Acidobacteria,  Actinobacteria,  Aquificae,  Armatimonadetes,  Bacteroidetes,  Caldiserica,  Caldithrix,  Chlamydiae,  Chlorobi,  Chloroflexi,  Cyanobacteria,  Deferribacteres,  Deinococcus-thermus,  Elusimicrobia,  Fibrobacteres,  Firmicutes,  Fusobacteria,  Gemmatimodetes,  Lentisphaerae,  Nitrospirae,  Planctomycetes,  Poribacteria,  Proteobacteria,  Spirochaetes,  Synergistetes,  Tenericutes,  Thermi,  Thermotogae,  Verrucomicrobia,  Crenarchaeota,  Euryarchaeota,  Parvarchaeota

Couverture temporelle

Date de début / Date de fin 2017-01-22 / 2017-01-30
Date de début / Date de fin 2017-02-05 / 2017-06-23

Données sur le projet

Es un trabajo de investigación multidisciplinario que busca evaluar la biodiversidad en la trancición Andino-Amazónica del departamento de Caquetá, sobre el camino Andaqui.

Titre Expedición Colombia-BIO a la biodiversidad en la transición Andino-Amazónica del departamento del Caquetá en el marco del programa Colombia BIO
Financement Convenio especial de cooperación no. Fp44842-460-2016 celebrado entre Fiduprevisora s.a. - Fiduprevisora s.a., actuando como vocera y administradora del Fondo Nacional de Financiamiento para la ciencia, la tecnología y la innovación, Fondo Francisco José de Caldas y el Instituto Amazónico de Investigaciones Científicas - SINCHI. Aunar esfuerzos para caracterizar la diversidad de la transición Andino-Amazónica del Caquetá con participación comunitaria en el marco del programa Colombia BIO.
Description du domaine d'étude / de recherche El Parque Natural Municipal Andaki- PNMA se ubica en el municipio de Belén de los Andaquíes (Caquetá ) y tiene un gradiente altitudinal que va desde los 2.700 hasta 350 msnm. Corresponde al área del piedemonte donde se concentran especies endémicas, amenazadas y una elevada diversidad biológica con muchos vacíos de información. Esta zona se ha convertido en un escenario clave del postconflicto y se está convirtiendo en uno de los principales focos de deforestación en el país. Existe una muy buena base social liderada por la Fundación Tierra Viva, que desarrolla iniciativas orientadas a la conservación de la biodiversidad y además tiene como función administrar el Parque. Ya que el PNMA está ubicado entre los límites del Parque Nacional Natural Alto Fragua Indi-Wasi, interfluvios del rio Pescado y el rio Bodoquero, con una extensión de 26.754 hectáreas, cumple una función muy importante como corredor biológico interandino desde el macizo colombiano a través del flanco Oriental de la cordillera oriental de los Andes.

Les personnes impliquées dans le projet:

Chercheur Principal
Gladys Inés Cardona Vanegas
Processeur
Maria Camila Escobar Restrepo
Chercheur Principal
Clara Patricia Peña Vargas

Méthodes d'échantillonnage

"En cada uno de los cinco puntos de muestreo, se colectaron alrededor de cinco (5) sub-muestras del suelo superficial (0-20cm), retirando la capa de hojarasca superficial si estuviera presente. Las sub-muestras se colectan en la misma bolsa plástica, y son homogenizadas para obtener una muestra compuesta de aproximadamente 200 gramos de suelo. En total se colectaron 54 muestras de suelo para la determinación de bacterias en laboratorio por técnicas moleculares. Para la determinación taxonómica de microorganismos del suelo (Bacterias y Arqueas) en el laboratorio, se siguió la metodología estandarizada en el laboratorio de biotecnología y recursos genéticos del Instituto Amazónico de Investigaciones Científicas –Sinchi. La extracción de ADN de agua, sedimentos y suelos se realizó usando los kits: powerwater DNA isolation Kit (MoBioLaboratories Carlsbad, CA), powersoil DNA isolation (MoBioLaboratories Carlsbad, CA) y núcleo spin soil –DNA, RNA and proteinpurification (macherey-nagel Alemania), respectivamente. Siguiendo las instrucciones del fabricante. Se amplificó la región V3-V4 del gen 16S ARNr con los iniciadores S-D-Bact-0341-b-S-17, 5-CCTACGGGNGGCWGCAG-3 y S-D-Bact-0785-a-A-21, 5-GACTACHVGGGTATCTATCC-3 descritos por Herlemann et al. (2011). Las muestras fueron enviadas a Macrogen (Corea) para ser secuenciadas en una corrida de paired-endMiSeq2 X 300. El análisis de las secuencias se realizó con el programa QIIME scripts versión 1.8.0-20140103 (Caporaso et al. 2010). La asignación taxonómica se realizó con la base de datos de Greengenes. La abundancia relativa de los diferentes grupos microbianos se estimó en cada comunidad comparando el número de secuencias clasificadas que pertenecen a un grupo bacteriano específico versus el número de secuencias clasificadas por muestra."

Etendue de l'étude El estudio se realizó en el camino Andaqui, en el municipio de Belén de los Andaquies, departamento del Caquetá. Por la trocha del camino Andaqui se hizo un recorrido desde la divisoria de aguas límite de los departamentos del Huila y Caquetá, hasta la vereda de las verdes, hasta los puentes de la quebrada de las verdes y el río pescado. En total se realizaron 11 puntos cada 125 metros sobre el nivel del mar, desde 1875 hasta los 500 msnm los cuales fueron numerados con respecto a su altura, donde la altura máxima de 1875 msnm era la 1, y la altura mínima de 500 msnm fue 11. Los puntos se realizaban en las zonas que estaban a la altura exacta y contaban con una cobertura natural, lo menos intervenida posible, por lo que en algunos puntos no fue posible realizar el punto y se realizaron en otros lugares por encontrarse pastos de ganadería.
Contrôle qualité En campo las bolsas se marcaron con el número de cada punto, con las siglas del nombre del municipio de muestreo Belén de los Andaquies (BA), un número continuo para las alturas de los puntos de muestreos donde la altura máxima de 1875 msnm, así: BA1875. En laboratorio se mantuvo el mismo código para identificar cada una de las muestras durante el aislamiento de las esporas de los hongos, la cual es la estructura morfológica para su determinación taxonómica. El mismo código fue usado para la muestra de suelo para determinar hongos formadores de micorrizas arbusculares por métodos moleculares.

Description des étapes de la méthode:

  1. Para la generación de las librerías, primero se llevó a cabo la extracción de ADN a partir de las muestras de suelo. El ADN fue extraído utilizando el kit NucleoSpin®Soil (Macherey-Nagel) siguiendo las especificaciones del fabricante. El ADN obtenido fue verificado en un gel de agarosa 1X y cuantificado por Nanodrop y Quibit.
  2. Los ADNs metagenómicos extraídos de las muestras de suelo fueron secuenciadas en una corrida de paired-endMiSeq2X300 (Macrogen). La región amplificada con los iniciadores S-D-Bact-0341-b-S-17, 5-CCTACGGGNGGCWGCAG-3 y S-D-Bact-0785-a-A-21, 5-GACTACHVGGGTATCTATCC-3 descritos por Herlemann et al., (2011), corresponde a la región V3-V4 del 16S ARNr.
  3. El análisis de las secuencias obtenidas se realizó con los programas bioinformaticos FLASH, QIIME (Caporaso et al. 2010) y SWARM (2.0 algorithm) (Mahé et al. 2014). Los datos Paired end fueron concatenados en un único archivo usando FLASH 1.2.11(Fast Length Adjustment of SHortreads)(http://bioinformatics.oxfordjournals.org/content/27/21/2957.full). Una vez ensambladas, las secuencias fueron sometidas a un control de calidad usando los "phred quality scores" contenidos en los archivos.fastq. Para tal propósito se utilizó el comando fastq_quality_filter -q 25 -p 80 -i all.fastq -o all.filtered.fastq -Q33, de la suite FAstXtoolkit. Se retuvieron para los posteriores análisis las secuencias ensambladas cuyos phred scores estuvieron por encima de 25.
  4. Con base en las secuencias de alta calidad, se procedió a agrupar las secuencias en unidades taxonómicas operacionales (OTUs) utilizando el algoritmo de clustering SWARM. Con este fin, se hicieron diversas manipulaciones en el formato de las secuencias, para ajustarlas a los requerimientos del SWARM. El proceso de clustering consiste en la comparación pareada de las de las secuencias que pasaron el control de calidad, para agruparlas de acuerdo con su similaridad. Este procedimiento generó secuencias únicas, que posteriormente fueron agrupadas en OTUs.
  5. Con el fin de eliminar las secuencias quiméricas se utilizó la aplicación UCHIME y se generaron dos tablas de OTUs en las que solo se retuvieron los OTUs que se encuentran en más de 5 y 10 muestras. Con estos procedimientos se eliminan las secuencias que se encuentran poco representadas en el set de datos para que los análisis posteriores sean más confiables. Finalmente, a cada uno de los OTUs, se les hizo una asignación taxonómica utilizando el alineador del Ribosomal Database Project (Wang et al. 2007) y la base de datos SILVA 111 (Quast et al. 2012) como referencia de alineamiento. Este proceso generó un archivo con la asignación taxonómica de seis niveles de resolución (Kindom, Phylum, Clase, Orden, Familia, genero, especie).
  6. La abundancia relativa de los diferentes grupos microbianos fue estimada en cada comunidad comparando el número de secuencias clasificadas que pertenecen a un grupo bacteriano específico versus el número de secuencias clasificadas por muestra.
  7. Para simplificar el análisis de los datos, las alturas fueron agrupadas en 3 categorías: alta (2000 -1325 msnm), media (1250 – 875 msnm), y baja (750 - 500 msnm).

Citations bibliographiques

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  15. Oliveros JC (2007) VENNY. An interactive tool for comparing lists with Venn Diagrams. http://bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/index.html.

Métadonnées additionnelles

Identifiants alternatifs 10.15472/6sg16z
94281e3c-4518-498a-acd7-529f2cb61541
https://ipt.biodiversidad.co/sinchi/resource?r=colombiabio_andaquies_micro_bca