說明
La colección de microorganismos asociados al cacao de CasaLuker S.A. es el repositorio de información acerca de la biodiversidad asociada a la cadena de valor del cacao. Su objetivo es identificar, catalogar y divulgar información taxonómica y ecológica de microorganismos que puedan mejorar el cultivo y procesamiento de cacao, además de promover la conservación ex situ de los mismos. Esta colección facilitará el desarrollo de proyectos de investigación científica y agrícola en conjunto con otras instituciones, generando conocimiento que permita obtener mejores productos derivados del cacao, y, a la vez, apoyar estrategias de conservación de la biodiversidad y gestión de servicios ecosistémicos en este sector productivo.
Actualmente, esta colección está conformada por hongos (111 hongos filamentosos y 10 levaduras) y bacterias (223) aisladas de procesos de postcosecha de cacao (fermentación), así como de frutos de cacao, en las fincas Granja Luker, Palestina, Caldas; Finca el Paraíso, Villanueva, Casanare y Finca Necoclí, Necoclí, Antioquia.
資料紀錄
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版本
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如何引用
研究者應依照以下指示引用此資源。:
Rodriguez López C M, Cepeda M L, Galeano Vanegas N F, Del Portillo Obando P, Calderon D, De Brito Brandão P F, González Barrios A F, Fernández Niño M, Aguirre Mejia J L, Olarte Noreña H H, Chica Morales M J, Cortes Mera D M, Universidad Católica de Manizales, CorpoGen, Universidad Nacional de Colombia, Universidad de los Andes (2025). Colección de Microorganismos asociados al cacao de CasaLuker S.A.. Version 1.5. CasaLuker S.A.. Occurrence dataset. https://doi.org/10.15472/729vjx
權利
研究者應尊重以下權利聲明。:
此資料的發布者及權利單位為 CasaLuker S.A.。 This work is licensed under a Creative Commons Attribution (CC-BY 4.0) License.
GBIF 註冊
此資源已向GBIF註冊,並指定以下之GBIF UUID: 639c016d-ad77-4910-bbbd-a416d061a691。 CasaLuker S.A. 發佈此資源,並經由Colombian Biodiversity Information System同意向GBIF註冊成為資料發佈者。
關鍵字
Theobroma Cacao; Fermentacíon; Postcosecha; Microorganismos; Procariotas; Bacteria; Hongos; Levaduras; Occurrence; Specimen
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- Av. Santander #No. 60
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- Centro de investigación
- Cra. 4 # 20 - 41
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- Universidad
- Carrera 45 N° 26-85
- 元數據提供者
- Universidad
- Cra. 1 #19-27
地理涵蓋範圍
Los datos se tomaron en la finca GranjaLuker en el municipio de Palestina, Caldas, Colombia.
| 界定座標範圍 | 緯度南界 經度西界 [5.002, -75.753], 緯度北界 經度東界 [5.137, -75.601] |
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分類群涵蓋範圍
De 223 bacterias aisladas, se identificaron 63 hasta nivel de genero, 15 hasta nivel de especie y 145 hasta nivel de reino. De 121 hongos aislados, se identificaron 1 hasta nivel de genero, 47 hasta nivel de especie y 73 hasta nivel de reino.
| Kingdom | Fungi, Bacteria |
|---|---|
| Phylum | Pseudomonadota, Proteobacteria, Ascomycota, Bacillota, Basidiomycota |
| Class | Alphaproteobacteria, Eurotiomycetes, Sordariomycetes, Saccharomycetes, Bacilli, Agaricomycetes, Gammaproteobacteria, Dothideomycetes |
| Order | Pleosporales, Glomerellales, Trichocomaceae, Eurotiales, Diaporthaceae, Xylariales, Bacillales, Enterobacterales, Hypocreales, Acetobacterales, Microascales, Lactobacillales, Saccharomycetales, Agaricales, Psathyrellaceae |
| Family | Clavicipitaceae, Pleosporaceae, Bionectriaceae, Psathyrellaceae, Acetobacteraceae, Hypocreaceae, Enterobacteriaceae, Ophiocordycipitaceae, Diaporthaceae, Trichocomaceae, Bacillaceae, Dipodascaceae, Marasmiaceae, Nectriaceae, Ceratocystidaceae, Glomerellaceae, Hypoxylaceae, Xylariaceae, Lactobacillaceae |
時間涵蓋範圍
| 起始日期 / 結束日期 | 2015-12-18 / 2025-10-09 |
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計畫資料
Por la cual se otorga el permiso de colecta y el acceso a recursos genéticos y sus productos derivados a CASALUKER S.A. para las actividades del proyecto “Estudio de las comunidades microbianas asociadas al cultivo y postcosecha del cacao en Colombia” del Contrato de Acceso a Recursos Genéticos y Productos Derivados No. 284 de 2020.
| 計畫名稱 | Estudio de las comunidades microbianas asociadas al cultivo y postcosecha del cacao en Colombia |
|---|---|
| 辨識碼 | Resolución No. 0523 del 19 de junio del 2020 del Ministerio de Ambiente y Desarrollo Sostenible |
| 經費來源 | CasaLuker S.A. |
| 研究區域描述 | El proyecto se desarrolla en la finca GranjaLuker en el municipio de Palestina, Caldas. Se han colectado aislados de bacterias, hongos filamentosos y levaduras, a partir de muestras de fruto y grano de cacao en la etapa de postcosecha del cacao (Theobroma cacao). |
| 研究設計描述 | Esta colección se desarrolla en el marco del proyecto “Estudio de las comunidades microbianas asociadas al cultivo y postcosecha del cacao en Colombia” cuyo objetivo es explorar los microrganismos asociados al cultivo y postcosecha del cacao en Colombia, con el fin de identificar propiedades o funciones que beneficien la cadena de valor del cacao. Para esto se recolectaron muestras de frutos de cacao y granos de cacao durante diferentes procesos de fermentación, en GranjaLuker, Palestina, Caldas. Se colectaron microrganismos de la fracción cultivable y se caracterizaron, evaluando su papel y posibles nuevas aplicaciones. Inicialmente, se realizó una caracterización morfológica, y posteriormente, se realizó la identificación a nivel molecular de los microorganismos de mayor interés. Los microorganismos presentes en el proceso de fermentación del cacao juegan un papel fundamental en los cambios físicos y químicos del grano, así como en el desarrollo del sabor y aroma. De acuerdo a reportes previos se esperó encontrar en los procesos de colecta: levaduras como Hanseniaspora uvarum, Saccharomyces cerevisiae, Pichia kudriavzevii, Candida guilliermondii, Schizosaccharomyces pombe (Pereira et al., 2012; Ho et al., 2015; Nielsen et al., 2013; Da Veiga et al., 2013), bacterias ácido lácticas como Lactobacillus fermentum, Lactobacillus casei, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus brevis, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus delbruecki (De Vuyst y Weckx, 2016; Ho et al., 2015; Da Veiga et al., 2013; Papalexandratou et al., 2013; De Melo et al., 2012; Rodríguez-López et al., 2020), y bacterias acéticas como Acetobacter pasteurianus, Gluconobacter oxydans, Acetobacter pasteurianus (Nielsen et al., 2007; Schwan y Habones, 2004; Ho et al., 2015; De Vuyst y Weckx, 2016). Adicionalmente, se han reportado otras bacterias como Bacillus spp, Bacillus subtilis, Micrococcus spp, Pantoea spp (Schwan y Habones, 2004; Kouame et al., 2015; De Melo et al., 2012; García et al., 2010; Papalexandratou et al., 2011), y hongos filamentosos como Fusarium oxysporum, Mucor racemosus, Paecilomyces variotii, Penicillium citrinum, Penicillium implicatum, Penicillium spinulosum (Schwan y Wheals, 2004; Ardhana y Fleet, 2003). Los microorganismos previamente mencionados en conjunto forman diferentes compuestos volátiles y no volátiles como: alcoholes, aldehídos, cetonas, ésteres, ácidos carboxílicos, pirazinas, azúcares, entre otros, que dan origen a formación de precursores sensoriales (favorables o desfavorables) que participan en el desarrollo de la calidad del grano proporcionando al cacao propiedades de sabor y aroma (Schwan y Habones, 2004; Ardhana y Fleet, 2003). Algunos de estos microorganismos reportados han sido estudiados por su potencial aplicación en retención de metales y metaloides tóxicos, como probióticos, promotores de crecimiento vegetal (realizando fijación de nitrógeno o solubilizando fosfatos), como antagonistas de microorganismos patógenos y transformadores de materia orgánica encargados de la producción de enzimas proteolíticas, celulolíticas, amilolíticas, pectinolíticas entre otras (tratamiento de desechos agroindustriales) (Thomas, 2010; Melnick, 2011 ). |
參與計畫的人員:
取樣方法
Las muestras recolectadas son representativas de la finca GranjaLuker, Palestina, Caldas, Colombia. Se estudiaron varios procesos de fermentación entre los años 2015 y 2021. Para los montajes experimentales se recolectaron entre 2000 y 4000 mazorcas de cacao de las variedades disponibles en la finca GranjaLuker (TSH 565, FSA 13, ICS-1 y Luker 40, entre otros). Se tomaron aleatoriamente frutos de cacao (o mazorcas) maduras previo al proceso de desgranado. Para el montaje de los procesos de fermentación se tomaron todas las medidas de asepsia. En cajones de madera se adicionaron masas de cacao con tamaños entre 200 y 400 kg y se tomaron muestras de 200 a 500 g de fermento de cacao durante el proceso de fermentación desde el inicio hasta el día 8, evaluando simultáneamente la temperatura, el pH y el porcentaje de granos bien fermentados. Se realizaron volteos de la masa de cacao cada 48 horas hasta la finalización del proceso. A partir del 2022, se toman frutos de cacao sanos de 2 a 3 meses de edad.
| 研究範圍 | El proyecto se desarrolla en la finca Granja Luker en el municipio de Palestina, Caldas. Entre el año 2015 y 2021 se colectaron aislados de bacterias, hongos filamentosos y levaduras, de muestras de fruto de cacao y granos de cacao cada día durante procesos de fermentación. A partir del 2022, se colectan aislados de bacterias y hongos filamentosos endófitos del frutos de cacao. |
|---|---|
| 品質控管 | En todos los procesos de muestreo y procesamiento se tomaron medidas de asepsia, tomando entre tres y cinco replicas experimentales. En los procesos de aislamiento se seleccionaron solamente colonias axénicas, consideradas puras por su morfología a nivel macro y microscópico. Una vez criopreservadas las cepas, se realizaron controles periódicos evaluando su viabilidad, estabilidad morfológica y pureza. En los procesos de identificación por técnicas moleculares por secuenciación de genes "housekeeping" (16S rRNA e ITS), así como de genoma completo, se utilizó ADN extraído o amplificado a una concentración superior a 50 ng/µL, y razón 260/280 = 1,8-2,0. Se realizó la comparación de las secuencias obtenidas con secuencias reportadas en bases de datos públicas (GenBank-NCBI, UNITE, RDP-Warcup Fungal ITS), tomando como criterio una similitud superior al 97-98% para identificar la cepa como perteneciente a una especie. Para confirmar la identificación taxonómica de los ejemplares que ingresen a la colección se utiliza la clasificación polifásica, la cual combina los caracteres fenotípicos clásicos y los genotípicos mencionados anteriormente, utilizando la literatura disponible para la identificación taxonómica: Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology, Bergey’s Manual of Systematic Bacteriology, The Procaryotes, International Journal of Systematic and Evolutionary Microbiology. |
方法步驟描述:
- Componente Bacterias: Para el estudio de las bacterias presentes en los procesos de fermentación de cacao se tomaron las muestras de grano de cacao desde el inicio hasta el día 8. En condiciones asépticas se pesaron de 5 a 10 g y se sumergieron en agua peptonada (en proporción 1:10). Posteriormente, se prepararon diluciones seriadas hasta 10-10, estas diluciones se siembran en diferentes medios de cultivo (Medio TSA, agar LB, agar nutritivo o agar OGY, entre otros) y bajo diferentes condiciones de cultivo (temperatura: 25 °C, 30 °C y 37 °C; tiempo de incubación: 48 h y 72 h). Para el estudio de bacterias endófitas, se tomaron 24 trozos del fruto de 1cm x 1cm de la zona entre el mesocarpo y el endocarpo. Estos trozos pasan por un proceso de desinfección y son inoculados en cajas de Petri con agar LB. Cada caja contiene 4 trozos y son incubados a 30°C hasta por 2 días. A partir de los cultivos de agar se seleccionaron colonias de acuerdo con su morfología (macroscópica y microscópica). Las cepas bacterianas que se consideraron axénicas fueron criopreservadas a – 80 °C en medio LB con glicerol en una concentración del 20% y depositados en la Colección de Microorganismos asociados al cacao de CasaLuker S.A (CMCL). Se realizó la identificación molecular de las cepas de mayor interés por su potencial en procesos biotecnológicos; para esto se realizó inicialmente un análisis de Single-Stranded Conformational Polimorfism (SSCP), siguiendo procedimientos previamente establecidos (Montaño-Salazar et al., 2018), mediante la discriminación de los perfiles electroforéticos únicos de las regiones V4 y V5 del gen 16S rRNA (Dohrmann & Tebbe, 2008). Para las bacterias que mostraron distintos perfiles de SSCP se realizó la amplificación del gen 16S rRNA (utilizando los primers 27F y 1492R), análisis bioinformáticos y asignación taxonómica mediante comparación con bases de datos (Rodríguez-López et al., 2020). Finalmente, se realizó la secuenciación del genoma completo de tres cepas por su potencial en procesos biotecnológicos; para esto se realizó la extracción de ADN genómico, se analizó la calidad y cantidad del ADN (Nanodrop y electroforesis en un gel de agarosa), y el proceso de secuenciación con tecnología de Illumina Paired End 150pb (Novogene).
- Componente Levaduras: Para el estudio de levaduras presentes en los procesos de fermentación se tomaron muestras de grano de cacao desde el inicio hasta el día 8. En condiciones asépticas se pesaron de 5 a 10 g y se sumergieron en agua peptonada (en proporción 1:10). Se prepararon diluciones seriadas hasta 10-10, y se sembraron en diferentes medios de cultivo (Medio TSA, agar Saboreaud o PDA), bajo diferentes condiciones de cultivo (temperatura: 25 °C y 30 °C; tiempo de incubación: 2 días y 1 semana). A partir de los cultivos de agar se seleccionaron colonias, se aislaron y se seleccionaron de acuerdo con su morfología. Los microorganismos aislados fueron criopreservados a – 80 °C y depositados en la Colección de Microorganismos asociados al cacao de CasaLuker S.A (CMCL).
- Componente Hongos filamentosos: Para el estudio de hongos filamentosos presentes en la postcosecha del cacao se tomaron muestras de frutos de cacao y granos desde el inicio hasta el día 8 del proceso de fermentación de cacao. En condiciones asépticas se cortaron trozos de 1 cm2 por cada mazorca muestreada, se pesaron de 5 a 10 g y se sumergieron en agua peptonada (en proporción 1:10). Se prepararon diluciones seriadas hasta 1x10-10, se sembraron en diferentes medios de cultivo (Medio TSA, Saboreaud o PDA) y bajo diferentes condiciones de cultivo (temperatura: 25 °C y 30 °C; tiempo de incubación: 2 días y 1 semana). Para la obtención de hongos endófitos, se toman 24 trozos del fruto de 1cm x 1cm de la zona entre el mesocarpo y el endocarpo. Estos trozos pasan por un proceso de desinfección y son inoculados en cajas de Petri con agar PDA. Cada caja contiene 4 trozos y son incubados a 30°C hasta por 15 días. A partir de los cultivos de agar se seleccionaron colonias, se aislaron y se seleccionaron de acuerdo con su morfología. Los microorganismos aislados fueron criopreservados a – 80 °C y depositados en la Colección de Microorganismos asociados al cacao de CasaLuker S.A (CMCL).
收藏資料
| 蒐藏名稱 | Colección de Microorganismos asociados al cacao de Casaluker S.A. |
|---|---|
| 蒐藏編號 | https://scientific-collections.gbif.org/collection/26b2d32e-19a9-487f-8862-514a427d5b8f |
| 上層採集品識別碼 | CMCL |
| 蒐藏名稱 | Colección de Microorganismos asociados al cacao de Casaluker S.A. |
|---|---|
| 蒐藏編號 | Registro Nacional de Colecciones Biológicas: 287 |
| 上層採集品識別碼 | CMCL |
| 標本保存方法 | Deep frozen, Refrigerated, Glycerin |
|---|
引用文獻
- Ardhana, M y Fleet, G. 2003. The microbial ecology of cocoa bean fermentation in Indonesia. Food Science and Technology, School of Chemical Sciences. The University of New South Wales, Sydney New South Wales 2052, Australia. International Journal of Food Microbiology 86 (2003) 87 – 99. DOI: 10.1016/s0168-1605(03)00081-3
- Leite HA, Silva AB, Gomes FP, Gramacho KP, Faria JC, de Souza JT, Loguercio LL. Bacillus subtilis and Enterobacter cloacae endophytes from healthy Theobroma cacao L. trees can systemically colonize seedlings and promote growth. Appl Microbiol Biotechnol 97(6) (2013) 2639-2651. DOI: 10.1007/s00253-012-4574-2
- Da veiga, Da Cruz, P., M. G.; Ferreira, D., W.; Ribeiro, D., D. y Schwan, r. F. 2013. Microbial succession and the dynamics of metabolites and sugars during the fermentation of three different cocoa (Teobroma cacao L.) hybrids. Food Research International 54 (2013) 9-17. https://doi.org/10.1016/j.foodres.2013.06.001
- De Melo Pereira GV, Magalhães KT, de Almeida EG, da Silva Coelho I, Schwan RF. Spontaneous cocoa bean fermentation carried out in a novel-design stainless steel tank: influence on the dynamics of microbial populations and physical-chemical properties. Int J Food Microbiol 161(2) (2013)121-33. DOI: 10.1016/j.ijfoodmicro.2012.11.018
- De Vuyst L, Weckx S. The cocoa bean fermentation process: from ecosystem analysis to starter culture development. J Appl Microbiol. 2016 Jul;121(1):5-17. DOI: 10.1111/jam.13045
- Dohrmann, A., & Tebbe, C. (2008). Section 3 update: Microbial community analysis by PCR-single-strand conformation polymorphism (PCR-SSCP). Molecular Microbial Ecology Manual. ISBN: 1402021763
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- Ho V. T. T., Zhao J., & Fleet G. The effect of lactic acid bacteria on cocoa bean fermentation. International Journal of Food Microbiology, 205(1) (2015) 54–67. DOI: 10.1016/j.ijfoodmicro.2015.03.031
- Kouame, l.; Goualie, B. G.; Adom, J. N.; Koua, G.; Honore, H. G.; Doue, G. y Niamke, S. 2015. Diversity of microbial strains involved in cocoa Fermentation from Sud-comoé (Cote D’Ivoire) Based on biochemical properties. Laboratoire de Biotechnologies, Filière Biochimie-Microbiologie, Unité de Formation et de Recherche en Biosciences, Université Félix Houphouët Boigny, Abidjan, Côte d’Ivoire. European Scientific Journal edition vol.11, No.18 (2015) 1857- 7431. ISSN: 18577881
- Melnick,R.L; Suarez, C; Bailey, B; Backman, P. Isolation of endophytic endospore-forming bacteria from Theobroma cacao as potential biological control agents of cacao diseases. Biological Control 57 (2011) 236-245. DOI: 10.1016/j.biocontrol.2011.03.005
- Montaño-Salazar, S. M., Lizarazo-Marriaga, J., & Brandão, P. F. B. Isolation and potential biocementation of calcite precipitation Iinducing bacteria from Colombian buildings. Current Microbiology, 75(3) (2018) 256–265. DOI: 10.1007/s00284-017-1373-0
- Nielsen DS, Teniola OD, Ban-Koffi L, Owusu M, Andersson TS, Holzapfel WH. The microbiology of Ghanaian cocoa fermentations analysed using culture-dependent and culture-independent methods. Int J Food Microbiol114(2) (2007) 168-86. DOI: 10.1016/j.ijfoodmicro.2006.09.010
- Pereira, G. V.; Magalhães, K. T.; Almeida, E. G.; Coelho, I. S. y Schwan, R. F. Spontaneous cocoa bean fermentation carried out in a novel-design stainless steel tank: Influence on the dynamics of microbial populations and physical–chemical properties. International Journal of Food Microbiology, 161 (2013) 121-133. DOI: 10.1016/j.ijfoodmicro.2012.11.018
- Papalexandratou Z, De Vuyst L. Assessment of the yeast species composition of cocoa bean fermentations in different cocoa-producing regions using denaturing gradient gel electrophoresis. FEMS Yeast Res. 11(7) (2011) 564-574. DOI: 10.1111/j.1567-1364.2011.00747.x.
- Papalexandratou; Camu, N.; Falony, G. y De Vuyst, L. Comparison of the bacterial species diversiry of spontaneous cocoa bean fermentations carried out at selected farms in Ivory Coast and Brazil. Food Microbiol. 28(5) (2013) 964-73. DOI: 10.1016/j.fm.2011.01.010
- Rodríguez-López, C. M., Guzmán-Beltrán, A. M., Lara-Morales, M. C., Castillo, E., & Brandão, P. F. B. (2020). AISLAMIENTO E IDENTIFICACIÓN DE Lactobacillus spp. (LACTOBACILLACEAE) RESISTENTES A Cd(II) Y As(III) RECUPERADOS DE FERMENTO DE CACAO. Acta Biológica Colombiana, 26(1), 19–29. DOI: 10.15446/abc.v26n1.83677
- Schwan RF, Wheals AE. The microbiology of cocoa fermentation and its role in chocolate quality. Crit Rev Food Sci Nutr. 44(4) (2004) 205-21. DOI: 10.1080/10408690490464104.
- Thomas, L; Gupta, A; Gopal, M; George, P; Thomas, G. Plant growth promoting potential of Bacillus spp. Isolated from rhizosphere of cocoa (Theobroma cacao L). Journal of Plantation Crops 38 (2010) 97-104. ISSN : 0304-5242
額外的詮釋資料
Este conjunto de datos fue publicado con el apoyo del proyecto CESP “OpenPSD – Engage and promote the private sector in open biodiversity data publication (ID CESP2019-004)”, y la alianza con la Asociación Nacional de Empresarios de Colombia (ANDI) a través de su iniciativa “Biodiversidad y Desarrollo” (Datos abiertos sobre biodiversidad desde el sector empresarial). Agradecemos la colaboración y el incentivo para compartir datos desde el sector empresarial. This dataset was published with support of the CESP project “OpenPSD – Engage and promote the private sector in open biodiversity data publication (ID CESP2019-004)”, and the alliance with the National Business Association of Colombia (ANDI) through its initiative "Biodiversity and Development" (Biodiversity open data from the private sector). We are grateful with the colaboration and incentive to share data from the private sector.
| 替代的識別碼 | 10.15472/729vjx |
|---|---|
| 639c016d-ad77-4910-bbbd-a416d061a691 | |
| https://ipt.biodiversidad.co/sib/resource?r=luker_coleccion-microorganismos |